病毒性神经坏死病毒继发感染哈维氏弧菌引起青斑黑身、趴底死亡一例

玉。

[病例290]
        海南省文昌市会文镇一室内青斑育苗水泥池，循环水养殖（见图1），2014年4月28日放苗2万尾，5月2日开始出现涨肚子、黑身、趴底死亡，用过一些营养保健药物，效果不十分明显。到5月9日，池中还剩下约3000~4000尾鱼苗。

       2014年5月9日上午11点到现场，可见池底有大量黑身的鱼，趴底，活力差（见图2），测定水温28℃。从池中取出2尾鱼，一尾外观正常的鱼，一尾呈“黑身”的鱼（见图3）。将取的两尾鱼剪断尾巴，从血液中接种进行细菌分离培养，并将整尾鱼用95%酒精浸泡做病毒检测。

       结果：两尾鱼均能检测出病毒性神经坏死病毒，且病毒粒子含量高（见图4）。正常鱼的血液中未分离出细菌，黑身鱼的血液中分离出大量的细菌（见图5），经过16S rDNA测序鉴定，该分离菌为哈维氏弧菌（Vibrio harveyi）。

       分析：1、近年石斑鱼育苗过程中由病毒性神经坏死病毒引起的“黑身”、“趴底”，死亡发病率非常高，危害也很大，严重者一夜之间死亡率达100%，该病毒主要危害幼鱼和仔鱼，对成鱼危害不大。发病后常常继发细菌感染，加重死亡。


       2、病毒性神经坏死病毒病主要通过亲鱼垂直传播，鱼卵的带毒率高，目前该病没有有效治疗方法，通过提前处理水质，育苗过程中保持环境稳定，减少发病的诱发因素，可以减少该病的发生和降低死亡率。（利洋研究所 雷燕 王惠儒 利洋会文店 程宁提供 2014.07.03）

南海渔医

5月初烟堆和冯家湾这次斑苗大面积的死亡，很值得商榷，并不是简单的神经坏死病毒或弧菌感染，这次病害发生在大雨后的一两天，主要是黑身爬底，接着大量死亡，几天内很多场不管大小苗的青斑和珍珠都损失超过5成，没爬底的也呈一定消瘦，大约5月10-15号左右才普遍稳定，我去采样的时候是20号，调查了7-8个场，这个时候黑身爬底的已经很少了，但也采了发病后两个场的几条青斑和珍珠，听几个场主介绍，这次病害的黑身与神经坏死病毒病的症状完全不同，几乎没见在水面侧卧“飘”的，而且大小苗都同时发病。
差不多在5月初的同一时间，也是那场大雨过后，西线的崖城几个场小珍珠也是这个黑身爬底症状，死亡超过8成，一个场的技术员当时用手机拍下病鱼的肠道照片，可见明显典型的微孢子的包囊，这个场我5月15号去的时候，还有不少苗爬底，解剖确诊是微孢子虫感染。
5月20号从烟堆采样的几条黑身爬底鱼，已经是离发病时候10多天了，肠道涂片是没有发现明显的微孢子虫，但肠上皮细胞核呈严重溶解状，有的核中有大的包涵体，但内脏并没有明显的细菌，至于神经坏死病毒，这两天正在检测。20号在烟堆从另外几个场检测到青斑和小珍珠，甚至小虎斑的肠道典型微孢子虫病。
发病高峰期时，很遗憾我当时没有得到信息，没有采到典型的病鱼，但从后期调查看，这次大雨后的大范围的流行死亡不太可能是神经坏死病毒病，更不可能是弧菌感染，微孢子虫病的急性发作应值得怀疑，从今年检测的多起车间斑苗病例看，以前微孢子虫病有明显瘦身，但今年几个场瘦身症状并不明显，就只是黑身爬底。这次病情值得注意的就是流行于5月初那两天暴雨后，渗透压变化是微孢子虫萌发的必要条件，烟堆那一片本来就是这个虫的重灾区，如果显微镜保养不好，或者不是经常看肠道压片，没有一定经验，是很难辨别肠道中的微孢子虫，这个虫与肠上皮细胞中的颗粒或白便颗粒非常像。

南海渔医

微孢子虫典型肠道症状镜检照片

南海渔医

微孢子虫在肠道上皮细胞核中发育