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[每周一例] 病毒性神经坏死病毒继发感染哈维氏弧菌引起青斑黑身、趴底死亡一例

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发表于 2014-7-3 23:29:21 |显示全部楼层
本帖最后由 水宝宝 于 2014-7-4 10:24 编辑

[病例290]
        海南省文昌市会文镇一室内青斑育苗水泥池,循环水养殖(见图1),2014年4月28日放苗2万尾,5月2日开始出现涨肚子、黑身、趴底死亡,用过一些营养保健药物,效果不十分明显。到5月9日,池中还剩下约3000~4000尾鱼苗。

       2014年5月9日上午11点到现场,可见池底有大量黑身的鱼,趴底,活力差(见图2),测定水温28℃。从池中取出2尾鱼,一尾外观正常的鱼,一尾呈“黑身”的鱼(见图3)。将取的两尾鱼剪断尾巴,从血液中接种进行细菌分离培养,并将整尾鱼用95%酒精浸泡做病毒检测。


       结果:两尾鱼均能检测出病毒性神经坏死病毒,且病毒粒子含量高(见图4)。正常鱼的血液中未分离出细菌,黑身鱼的血液中分离出大量的细菌(见图5),经过16S rDNA测序鉴定,该分离菌为哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)。


       分析:1、近年石斑鱼育苗过程中由病毒性神经坏死病毒引起的“黑身”、“趴底”,死亡发病率非常高,危害也很大,严重者一夜之间死亡率达100%,该病毒主要危害幼鱼和仔鱼,对成鱼危害不大。发病后常常继发细菌感染,加重死亡。

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       2、病毒性神经坏死病毒病主要通过亲鱼垂直传播,鱼卵的带毒率高,目前该病没有有效治疗方法,通过提前处理水质,育苗过程中保持环境稳定,减少发病的诱发因素,可以减少该病的发生和降低死亡率。(利洋研究所 雷燕 王惠儒 利洋会文店 程宁提供 2014.07.03)


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发表于 2014-7-4 11:34:18 |显示全部楼层
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5月初烟堆和冯家湾这次斑苗大面积的死亡,很值得商榷,并不是简单的神经坏死病毒或弧菌感染,这次病害发生在大雨后的一两天,主要是黑身爬底,接着大量死亡,几天内很多场不管大小苗的青斑和珍珠都损失超过5成,没爬底的也呈一定消瘦,大约5月10-15号左右才普遍稳定,我去采样的时候是20号,调查了7-8个场,这个时候黑身爬底的已经很少了,但也采了发病后两个场的几条青斑和珍珠,听几个场主介绍,这次病害的黑身与神经坏死病毒病的症状完全不同,几乎没见在水面侧卧“飘”的,而且大小苗都同时发病。
差不多在5月初的同一时间,也是那场大雨过后,西线的崖城几个场小珍珠也是这个黑身爬底症状,死亡超过8成,一个场的技术员当时用手机拍下病鱼的肠道照片,可见明显典型的微孢子的包囊,这个场我5月15号去的时候,还有不少苗爬底,解剖确诊是微孢子虫感染。
5月20号从烟堆采样的几条黑身爬底鱼,已经是离发病时候10多天了,肠道涂片是没有发现明显的微孢子虫,但肠上皮细胞核呈严重溶解状,有的核中有大的包涵体,但内脏并没有明显的细菌,至于神经坏死病毒,这两天正在检测。20号在烟堆从另外几个场检测到青斑和小珍珠,甚至小虎斑的肠道典型微孢子虫病。
发病高峰期时,很遗憾我当时没有得到信息,没有采到典型的病鱼,但从后期调查看,这次大雨后的大范围的流行死亡不太可能是神经坏死病毒病,更不可能是弧菌感染,微孢子虫病的急性发作应值得怀疑,从今年检测的多起车间斑苗病例看,以前微孢子虫病有明显瘦身,但今年几个场瘦身症状并不明显,就只是黑身爬底。这次病情值得注意的就是流行于5月初那两天暴雨后,渗透压变化是微孢子虫萌发的必要条件,烟堆那一片本来就是这个虫的重灾区,如果显微镜保养不好,或者不是经常看肠道压片,没有一定经验,是很难辨别肠道中的微孢子虫,这个虫与肠上皮细胞中的颗粒或白便颗粒非常像。
肠上皮细胞感染微孢子虫.JPG
肠上皮细胞核被感染微孢子虫.JPG
核由于感染微孢子虫而肿大.JPG
微孢子虫非典型阶段.JPG
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发表于 2014-7-4 11:37:07 |显示全部楼层
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微孢子虫典型肠道症状镜检照片
QQ截图20140704113632.jpg
水产前沿杂志预定
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发表于 2014-7-4 11:41:12 |显示全部楼层
微孢子虫在肠道上皮细胞核中发育
核中大量微孢子虫初期发育阶段.JPG
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